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Nat Commun：李峰團(tuán)隊(duì)基于CRISPR的超靈敏新冠抗體檢測技術(shù)
來源：四川大學(xué)化學(xué)學(xué)院 2022-08-17
導(dǎo)讀：近日，四川大學(xué)化學(xué)學(xué)院李峰教授團(tuán)隊(duì)將前期研發(fā)的蛋白傳譯技術(shù)與CRISPR診斷技術(shù)相結(jié)合，在臨床血液樣本中實(shí)現(xiàn)了新冠抗體的超靈敏檢測。該技術(shù)無需復(fù)雜的分離步驟，可以在原位將血液樣本中的新冠抗體轉(zhuǎn)化為預(yù)先設(shè)計(jì)化的核酸序列，并在此基礎(chǔ)上利用等溫?cái)U(kuò)增和CRISPR Cas12a反式切割實(shí)現(xiàn)超靈敏檢測。
近年來CRISPR技術(shù)在疾病診斷領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用前景，受到廣泛關(guān)注。特別是基于CRISPR的SHERLOCK和DETECTR技術(shù)已經(jīng)獲得美國FDA批準(zhǔn)被用于新冠病毒的超靈敏檢測，實(shí)現(xiàn)了臨床轉(zhuǎn)化。然而，當(dāng)前CRISPR技術(shù)僅能用于核酸檢測，尚無法有效實(shí)現(xiàn)蛋白類疾病標(biāo)志物的超靈敏檢測。針對(duì)這一瓶頸問題，四川大學(xué)化學(xué)學(xué)院李峰教授團(tuán)隊(duì)將前期研發(fā)的蛋白傳譯技術(shù)與CRISPR診斷技術(shù)相結(jié)合，在臨床血液樣本中實(shí)現(xiàn)了新冠抗體的超靈敏檢測。該技術(shù)無需復(fù)雜的分離步驟，可以在原位將血液樣本中的新冠抗體轉(zhuǎn)化為預(yù)先設(shè)計(jì)化的核酸序列，并在此基礎(chǔ)上利用等溫?cái)U(kuò)增和CRISPR Cas12a反式切割實(shí)現(xiàn)超靈敏檢測。該技術(shù)的檢測限為10 aM，比商品化的ELISA新冠抗體試劑盒靈敏一萬倍，因而能夠檢測到早期感染或免疫缺陷人群血液中的微量新冠抗體，有效實(shí)現(xiàn)新冠早期篩查或疫苗免疫轉(zhuǎn)化效率的監(jiān)測。在此基礎(chǔ)上，李峰團(tuán)隊(duì)通過與華西醫(yī)院泌尿外科林濤主任團(tuán)隊(duì)合作，成功實(shí)現(xiàn)了腎移植病人，這一特殊的免疫缺陷人群在注射新冠疫苗后的抗體水平監(jiān)測及注射疫苗加強(qiáng)針效用的評(píng)估。該研究以“A CRISPR-based ultrasensitive assay detects attomolar concentrations of SARS-CoV-2 antibodies in clinical samples”為題發(fā)表于Nature Communications上，四川大學(xué)為第一單位，化學(xué)學(xué)院李峰教授和華西醫(yī)院林濤主任為本文共同通訊作者，唐婭楠副教授和宋涂潤博士為本文并列第一作者。特別感謝國家自然基金委、四川省科技廳和四川大學(xué)青苗計(jì)劃的經(jīng)費(fèi)支持。
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