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在該研究中，研究團(tuán)隊(duì)首先通過純化含有 bpNLS 的蛋白質(zhì)和 MS 修飾的 gRNA，使得SpG和SpRY變體在斑馬魚基因組中可以有效地靶向幾乎所有PAM 的位點(diǎn)。之后，研究團(tuán)隊(duì)借助SpRY無PAM限制的特性，又構(gòu)建了可以靶向單堿基的單堿基編輯工具SpRY-CBE4max 和 zSpRY-ABE8e。通過大量的位點(diǎn)驗(yàn)證，脫靶率分析以及產(chǎn)物純度分析等，證實(shí)這些工具可以有效地編輯以前工具無法編輯的位點(diǎn)，并利用這些工具成功構(gòu)建了2種新的斑馬魚疾病模型。這些新開發(fā)的基因編輯工具將促進(jìn)斑馬魚模型在揭示基因功能、生理機(jī)制以及疾病發(fā)病機(jī)制和治療中的應(yīng)用。
我校梁芳為論文第一作者，秦偉和劉彥梅為本論文的共同通訊作者，我校為第一完成單位。該研究得到了國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃、國(guó)家自然科學(xué)基金、廣東省重點(diǎn)領(lǐng)域研究發(fā)展計(jì)劃及廣東省水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物病原生物學(xué)與流行病學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研究基金的支持。
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