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D-熒光素鉀鹽

CAS號(hào)	115144-35-9
規(guī)格	1克	純度	98%
貨號(hào)	luc001	貨期	現(xiàn)貨
品牌	sciencelight	庫(kù)存	100g
規(guī)格	1克
純度	98%
貨號(hào)	luc001
貨期	現(xiàn)貨
品牌	sciencelight
庫(kù)存	100g
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參考價(jià)：￥6000.00 元/克

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luc001	sciencelight	98%	1克	￥6000.00元/克	現(xiàn)貨

產(chǎn)品詳情

詳細(xì)信息(中文)：
發(fā)光原理
哺乳動(dòng)物生物發(fā)光，一般是將Firefly luciferase基因（由554個(gè)氨基酸構(gòu)成，約50KD）即熒光素酶基因整合到預(yù)期觀察的細(xì)胞染色體DNA上以表達(dá)熒光素酶，培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞株，當(dāng)細(xì)胞分裂、轉(zhuǎn)移、分化時(shí), 熒光素酶也會(huì)得到持續(xù)穩(wěn)定的表達(dá)。基因、細(xì)胞和活體動(dòng)物都可被熒光素酶基因標(biāo)記。將標(biāo)記好的細(xì)胞接種到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)后，當(dāng)外源（腹腔或靜脈注射）給予其底物熒光素(D-luciferin，potassium salt，以下均簡(jiǎn)稱熒光素)，即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象。所發(fā)的光波長(zhǎng)在540-600nm。這種酶在ATP，氧存在的條件下，催化熒光素的氧化反應(yīng)才可以發(fā)光，因此只有在活細(xì)胞內(nèi)才會(huì)產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象，并且發(fā)光光強(qiáng)度與標(biāo)記細(xì)胞的數(shù)目線性相關(guān)。

結(jié)構(gòu)與性能
熒光素在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng)，生成氧化熒光素(oxyluciferin)，并產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象。熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)的，約一分鐘就可以擴(kuò)散到小鼠全身。熒光素的半衰期約三個(gè)小時(shí)，只有活細(xì)胞才能夠持續(xù)表達(dá)熒光素酶。

(1) 熒光素不會(huì)影響動(dòng)物的正常生理功能。
(2) 熒光素是280道爾頓的小分子，水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透細(xì)胞膜和血腦屏障。
(3) 熒光素在體內(nèi)擴(kuò)散速度快，可通過(guò)腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)。腹腔注射擴(kuò)散較慢，持續(xù)發(fā)光長(zhǎng)。熒光素腹腔注射老鼠后約1min后表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞開(kāi)始發(fā)光，10min后強(qiáng)度達(dá)到穩(wěn)定的最高點(diǎn)，在最高點(diǎn)持續(xù)約20~30 min后開(kāi)始衰減，約3h后熒光素排除，發(fā)光全部消失，最佳檢測(cè)時(shí)間是在注射后15~35min之間；若進(jìn)行熒光素靜脈注射，擴(kuò)散快，但發(fā)光持續(xù)時(shí)間很短?？蒲腥藛T根據(jù)大量的實(shí)驗(yàn)總結(jié)出熒光素的合適的用量是150mg/kg，即體重20克的小鼠需要3毫克的熒光素。
(4) 觀察時(shí)間的間隔沒(méi)有最短限制，只要觀察的條件控制一致就可以。雖然底物在動(dòng)物體內(nèi)有一定的代謝過(guò)程，但是上一次底物的殘留曲線可以知道，可以控制對(duì)下一次觀察結(jié)果的影響。

儲(chǔ)存與運(yùn)輸
一般放在-20℃的冰箱即可，半年以上不使用放在-80℃的冰箱，溶解配制后放在4℃冰箱，短期運(yùn)輸放在4℃環(huán)境。

應(yīng)用領(lǐng)域
腫瘤，干細(xì)胞，藥物開(kāi)發(fā)，基因治療，轉(zhuǎn)基因小鼠，免疫學(xué)等等。

詳細(xì)信息(英文)：
Protocol 1: In Vitro Imaging of MDA-MB-231-luc and HCT116-Luc cells

Materials needed:
MDA-MB-231-luc cells (1 T175 flask)
HCT116-Luc (1 T75 flask)
Trypsin/EDTA
D-Luciferin Firefly, potassium salt（Sciencelight, Catalog# luc001）, 1.0 g /vial,
Sterile water
Complete media for each cell line
96 well black plates (Costar)
Procedure:
A. Luciferin Preparation
1. Prepare a 200X luciferin stock solution (30 mg/ml) in sterile water. Mix gently by inversion until luciferin is completely dissolved. Use immediately, or aliquot and freeze at -20?C for future use.
* Note: Reconstitute the quantity of D-Luciferin necessary for an individual experiment.
2. Prepare 2X luciferin (300ug/ml) in complete media. Quick thaw 200X stock solution and dilute 1:100 in complete media (2X solution)
* Note: This working solution should be prepared fresh for each experiment.
B. Cell Preparation and Serial Dilution
1. Trypsinize a flask and resuspend cells in a total of 10ml media.
2. Count cells and adjust cell concentration to 100,000 cells/ml = 10,000 cells/100ul.
3. Perform a serial dilution (1:2) in complete media as follows:
a. Pipette 200 ul cells into well #1 (in duplicate).
b. Add 100 ul media to wells #2-10 (in duplicate) using a multi-channel pipette.
c. Perform 1:2 serial dilution by pipetting 100ul from well #1 to well #2 using a multi-channel pipette, mixing well, then taking 100 ul from well 2 to well 3. Continue dilution to well #10 and discard 100 ul from well #10 after mixing.
C. Imaging Procedure
1. Add 100 ul 2X luciferin to cells in well #1-10.
2. Place plate of cells in the camera system on FOV15cm to view entire plate. Use the Plate Positioner or Alignment Grid to help position the plate.
3. Approximately 2-3 minutes after the addition of luciferin, image plate at 1 minute, 10 bin.
* Note: If using >10,000 cells in well #1, imaging time should de decreased.
D. Data Analysis
1. Apply grid ROI to image; measure photons/well.
2. Export measurements from

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物理化學(xué)性質(zhì)
英文名	D-Luciferin potassium salt
中文名	D-熒光素鉀鹽
CAS號(hào)	115144-35-9	溶解性	---
分子量	280.32300	熔點(diǎn)	---
密度	---	沸點(diǎn)	---

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聯(lián)系人：萬(wàn)春麗

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公司類型：貿(mào)易商
成立時(shí)間：2007-10-31
所在地區(qū)：上海市市轄區(qū)
注冊(cè)資本：10萬(wàn)元

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